·基本定義與化學(xué)結(jié)構(gòu)

AF555 TSA是一種橙紅色熒光染料，其激發(fā)波長約為555 nm，發(fā)射波長約為565 nm。它由Alexa Fluor 555熒光染料與酪胺分子通過共價鍵偶聯(lián)而成，具有高亮度、優(yōu)異的光穩(wěn)定性和良好的水溶性。

·基本信息介紹（資料卡）

中文名稱：AF555 酪胺綴合物；Alexa Fluor 555 酪胺綴合物；Alexa Fluor 555 酪胺共軛物；AF555酪胺;Alexa Fluor 555 酪胺

英文名稱：AF555 TSA;AF555 Tyramide；AF555 Tyramide Conjugates；AF555 TSA Conjugates；Alexa Fluor555 Tyramide；Alexa Fluor555 TSA

激發(fā)波長Ex(nm)：555

發(fā)射波長Em(nm)：565 

儲存條件：-20℃避光避濕

純度：≥95%

儲存條件：-20℃以下冰凍、干燥保存，避免反復(fù)凍融

供應(yīng)商：西安凱新生物

安全性：

操作時需佩戴防護裝備，避免接觸皮膚和眼睛。

如不慎接觸，請立即用大量清水沖洗，并尋求醫(yī)療幫助。

·核心作用原理：

利用辣根過氧化物酶（HRP）的催化作用實現(xiàn)信號放大。具體過程是：與目標(biāo)抗原結(jié)合的一抗被HRP標(biāo)記的二抗識別后，在低濃度存在下，HRP催化AF555-酪胺氧化，生成高反應(yīng)性的自由基中間體。這些自由基在HRP活性位點周圍約10 nm范圍內(nèi)，與鄰近蛋白的酪氨酸殘基等發(fā)生共價結(jié)合，從而將大量AF555熒光分子原位沉積在目標(biāo)位置，實現(xiàn)信號指數(shù)級放大

·AF555 TSA 常見問題分析解釋

一、無信號或信號弱

HRP失活：檢查二抗/鏈霉親和素-HRP是否新鮮，可用DAB底物測試酶活性。

反應(yīng)條件不足：TSA孵育時間需10-30分鐘，確保反應(yīng)液含0.001%-0.003%新鮮H?O?。

靶點豐度低：嘗試4℃一抗過夜孵育，或適當(dāng)增加一抗?jié)舛取?/p>

二、背景過高

反應(yīng)過度：縮短TSA反應(yīng)時間至5-15分鐘，或使用專用終止液。

內(nèi)源性過氧化物酶：封閉步驟中加入3% H?O?處理10分鐘滅活。

洗滌不充分：每步洗滌3次×5分鐘，可增加吐溫-20至0.1%-0.3%。

三、多重標(biāo)記兼容性

順序標(biāo)記：第一輪TSA→3% H?O?滅活HRP 15-20分鐘→第二輪TSA。

光譜選擇：推薦組合AF488（綠）、AF555（橙紅）、AF647（遠紅），確保光譜無重疊。

·相關(guān)試劑

Cyanine7 alkyne

Cyanine5.5 DBCO

AF 488 TFP ester

Cyanine3 DBCO

BDP TR hydrazide

R110 azide, 6- isomer

Cyanine5.5 tetrazine

FAM amine, 5-isomer

sulfo-Cyanine5.5 azide

sulfo-Cyanine3.5 amine

sulfo-Cyanine5.5 DBCO

BDP 576/589 NHS ester

LumiTracker Lyso Green

YODi-3, red fluorescent nucleic acid stain

Amine-PEG3-carboxylic acid, hydrochloride

YO-TAP-1, green fluorescent nucleic acid stain

TO-TAP-3, far-red fluorescent nucleic acid stain

以上內(nèi)容均由西安凱新生物科技有限公司YNN編輯整理

該試劑僅用于科研實驗，不可用于人體