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前言
小干擾RNA（siRNA）藥物作為當(dāng)前火爆的治療藥物，具有高度特異性，靶點(diǎn)范圍廣，可以實(shí)現(xiàn)長效作用的特點(diǎn)。siRNA一般指長為19~23個(gè)核苷酸序列的雙鏈RNA，采用化學(xué)合成是最直接的獲得siRNA的方法。對(duì)于純度和雜質(zhì)的分析一般采用的液相色譜方法包括：反相離子對(duì)色譜法和離子交換色譜法。
本篇采用 Leaps Pro Bio生物惰性系統(tǒng)，使用陰離子交換色譜法快速對(duì)siRNA藥物中正反義鏈及其雜質(zhì)進(jìn)行了分離。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠，與某國外品牌生物惰性儀器峰形及結(jié)果基本一致。Leaps Bio生物惰性系統(tǒng)滿足核酸藥物對(duì)高效液相色譜儀惰性系統(tǒng)的要求，該系統(tǒng)可以應(yīng)用于核酸藥物純度分析、雜質(zhì)分析等。
色譜條件
儀器：Leaps Pro Bio生物惰性系統(tǒng)
色譜柱：LotusBio SAX（4.6×250 mm, 5 μm）
流速：0.5 mL/min
流動(dòng)相：A：20 mM緩沖鹽 B：A+1.5M NaCl
柱溫：30℃
進(jìn)樣體積：5 μL（樣品濃度約2 mg/mL）
紫外檢測波長：260 nm
圖1 siRNA正反義鏈及雜質(zhì)混合樣品譜圖—Leaps Bio
表1 siRNA正反義鏈及雜質(zhì)樣品結(jié)果表
圖2
siRNA正反義鏈及雜質(zhì)混合樣品譜圖—某生物惰性儀器
Leaps Pro Bio生物惰性液相色譜系統(tǒng)
實(shí)現(xiàn)高效生物樣品分析
真正采用生物惰性的樣品流路
耐腐蝕和抗吸附的色譜系統(tǒng)
適用于生物和 pH 應(yīng)用
確保生物樣品分析穩(wěn)定可靠
優(yōu)異的生物惰性系統(tǒng)
1
PEEK、鈦等生物兼容材料
2
輕松適用于生物和 pH 應(yīng)用
3
限度降低金屬吸附而造成的損失
更高體驗(yàn)的樣品輸送
1
接觸式高效集成冷卻系統(tǒng)，快速可達(dá)設(shè)定溫度范圍4℃-室溫
2
可擴(kuò)展至4×樣品盤，可放置216位（54*4）或384位（96*4），實(shí)現(xiàn)更高通量
3
無樣品損失的高重復(fù)性
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