LC-MS液質(zhì)聯(lián)用方法
可被用于檢測(cè)低量的殘余蛋白
原理:
液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)又叫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),它以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜為檢測(cè)系統(tǒng)。樣品在質(zhì)譜部分和流動(dòng)相分離,被離子化后,經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按離子的質(zhì)荷比分離,然后經(jīng)檢測(cè)器測(cè)量各種離子譜峰的強(qiáng)度得到質(zhì)譜圖。質(zhì)譜分析是先將物質(zhì)離子化,而實(shí)現(xiàn)分析目的的一種分析方法。應(yīng)用LC/MS/MS在復(fù)雜體系中定量蛋白質(zhì)的前提是質(zhì)譜對(duì)相應(yīng)蛋白質(zhì)定性的結(jié)果準(zhǔn)確可靠,所以要選擇分離蛋白效果較好的色譜柱。
操作步驟:
系統(tǒng)準(zhǔn)備---流動(dòng)相準(zhǔn)備----樣品制備---建立方法----數(shù)據(jù)的采集和處理